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GelRed核酸染料的产品特性
GelRed核酸染料产品特性：1.高灵敏度GelRed和GelGreen是目前市场中zui灵敏的凝胶核酸染料2.GelRed核酸染料更安全艾姆斯氏试验结果表明，该染料的诱变性远小于溴化乙锭(EB)3.稳定性*可以使用微波炉加热，可以在室温下保存4.信噪比高样品荧光信号强，背景信号低。5.GelRed核酸染料有广泛的适应性适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色6.染色过程简单与EB一样，在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗，即可直接用紫外...
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2015-01-21
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脂质体2000转染DNA的操作过程
脂质体2000适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下zui方便的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5~100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。用脂质体2000进行转染时，首先需优化转染条件，应找出该批LR对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等，对每批LR都要做：先要固定一个DNA的量和DNA/LR混合物与细胞相互作用的时间，DNA可从1~5μg和孵育时间6小时开始，按这两个参数绘出相应LR需用量的曲线，再选用LR和DNA两者*的剂量，确定出转染...
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2015-01-13
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HyClone胎牛血清培养平滑肌细胞的两种方法
HyClone胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzymedisperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法：动物经颈动脉放血后，在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段，置于含Hank's液的平皿中漂洗3次，将凝块洗干净后剥除外膜的纤维脂肪层，然后纵行切开血管，刮除内膜即内皮细胞迅速撕下中膜内、中层，切成约1mm宽的小条，浸泡在含血清的Hank's液中，并将撕下小组织块种植于培养瓶壁。置于37℃恒温箱，2h左右，取出培养瓶加入20...
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2015-01-06
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纤维素酶的性质及作用机理详解
纤维素酶分子的大小因来源不同而不尽相同，三大类酶分子量一般在23Kda～146Kda之间。多数真菌和少数细菌的纤维素酶都受糖基化，糖基与蛋白之间以共价键结合，或呈可解离的络合状态。糖基化作用在一定程度上保护酶免受蛋白酶的水解，而纤维素酶正是由于糖基化，使其所含碳水化合物的比率在不同酶之间发生差异，导致酶的多形式和分子量的差别。通过比较分析，人们发现许多不同纤维素酶间表现出一定的同源性，且纤维素酶分子普遍具有类似的结构。由球状的催化结构域(CD)、连接桥和纤维素结合结构域(CB...
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2014-12-20
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琼脂糖凝胶电泳实验之凝胶制作与点样
一、琼脂糖凝胶制作1、琼脂糖凝胶浓度配制凝胶的浓度据实验需要而变，一般在0．8％～2．0％之间，如果一次配制凝胶100ml，没用完的凝胶可以再次融化，但随着融化次数的增加，水分丢失也越多，凝胶浓度则会越来越高，导致实验结果不稳定，补水办法：一是在容器上标记煮胶前的刻度，煮胶后补充相应的水分至原刻度；二是在煮胶前称重，煮胶后补充水至原重量。粗略一点的方法是通过多次较恒定的煮胶条件得出一个经验补水值。以保证凝胶浓度基本维持在原浓度。核酸染色剂溴化乙锭(ethidiumbromid...
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2014-12-10
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脂质体2000转染细胞实验材料及操作步骤
一、脂质体2000转染细胞实验材料：1、Vero细胞2、转染级质粒3、DMEM细胞培养液：无血清DMEM、10%血清DMEM4、脂质体20005、6孔细胞培养板二、脂质体2000转染细胞实验操作步骤：（以6孔板为例予以说明）1、细胞铺板：转染前一天进行铺板，第二天待细胞长成单层即可进行转染。（Vero细胞按一传三的比例进行传代，一般10~12h即可。）2、溶液1：240ul无血清DMEM+10ullipofectamine2000perwell（总体积250ul）（温育5mi...
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2014-12-05
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