HyClone胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。HyClone胎牛血清沉淀物是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。
当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。当然,购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。我们总结血清沉淀融化三步骤,具体如下:
*步:室温90min或者15-20°C水浴18min。
第二步:20°C水浴25min。
第三步:37°C水浴35min。
如果内有头皮屑絮状沉淀,说明脂蛋白和纤连蛋白析出,不会影响细胞培养状态。
另外,我们建议您在使用HyClone胎牛血清的时候,注意下列的操作:
1.解冻HyClone胎牛血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
2.解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
3.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
4.HyClone胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
5.若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
掌握以上内容,可以有效避免HyClone胎牛血清沉淀物的发生。