NC膜、 PVDF膜 、尼龙膜之间的区别看完就懂

　　western blot中膜的选择是实验成功的关键点，Western blot实验中一般可以选择硝酸纤维素膜(NC) 和PVDF膜，那NC膜和PVDF膜有什么区别呢?怎样才能选择最恰当的杂交膜进行Western blot实验呢?
 

　　NC膜、 PVDF膜 、尼龙膜的特点
 

　　尼龙膜是较理想的核酸固相支持物，有多种类型;硝酸纤维素膜(NC膜)是目前应用*的一种固相支持物，便宜;PVDF膜介于二者之间。
 

　　就结合能力而言：尼龙膜结合DNA和RNA能力可达480-600μg/cm2，可结合短至10bp的核酸片段;硝酸纤维素膜(NC膜)结合DNA和RNA能力可达80-100μg/cm2，对于200bp的核酸片段结合能力不强;PVDF膜结合DNA和RNA能力可达125-300μg/cm2。
 

　　就温度适应性而言：尼龙膜经烘烤或紫外线照射后，核酸中的部分嘧啶碱基可与膜上的正电荷结合;硝酸纤维素膜(NC膜)依靠疏水性相互作用结合DNA，结合不牢固;PVDF膜结合牢固，耐高温，特别适合于蛋白印迹。
 

　　就韧性而言：尼龙膜较强;硝酸纤维素膜较脆，易破碎;PVDF膜较强。
 

　　就重复性而言：尼龙膜可反复用于分子杂交，杂交后，探针分子可经碱变性被洗脱下来;硝酸纤维素膜(NC膜)不能重复使用;PVDF膜可以重复使用。
 

　　PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20000的蛋白选用0.45um的膜，小于20000的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在使用是需预处理，用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。PVDF膜具有较高的机械强度，是印迹法中的理想固相支持物材料。