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+品牌 | CellWorld | 货号 | C0260-117 |
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规格 | 1ml | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 实验 | 应用领域 | 生物产业 |
Hoechst 33342 染色液
产品简介:
Hoechst 33342/PI 双染试剂盒(Hoechst 33342/PI Double Stain Kit)采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)双染的方法以区分凋亡细胞和坏死细胞的试剂盒。其检测原理是:细胞核荧光染料Hoechst 33342可以穿透细胞膜,嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。对于正常细胞,其可少许进入细胞膜使其染上低蓝色。而凋亡细胞由于细胞膜通透性增强,从而使得进入凋亡细胞内的Hoechst 33342明显多于正常细胞,荧光强度比正常细胞要高。另外,细胞发生凋亡时染色质会固缩,从而使得染料能更有效和聚集的结合于DNA,并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受损而不能有效的将Hoechst 33342排除到细胞外使其在细胞内的积累增加,这些特征都使得凋亡细胞经染色后荧光会比正常细胞明显增强。但细胞核荧光染料PI不能穿透细胞膜完整的正常细胞或凋亡细胞,即活细胞对PI染料拒染。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性在早期即已丧失,可被PI染色。
产品描述:
本产品为液体(1X)染色液,已经过 0.1μm过滤,不含细菌、支原体等。
浓度:1mg/mL
规格: 1ml/支
有效期: 12个月
储存温度: -20℃
运输条件:低温运输
使用说明
Hoechst 33342 使用介绍:
※ Hoechst 33342也被称为:bisBenzimide H33342 或者 HOE33342。
※ Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料产品,对细胞的毒性相对较低。
※ Hoechst 33342 染色经常用在细胞凋亡检测过程中使用,染色后可采用荧光显微镜进行观察或采用流式细胞仪检测。Hoechst 33342 也可用于普通细胞核染色使用或DNA染色过程使用。
※ Hoechst 33342 的最大激发波长:346nm,最大发射波长:460nm;Hoechst 33342 和 双链DNA进行结合后的最大激发波长:350nm,最大发射波长:461nm。
※ Hoechst 33342可溶于水,溶解度可以达到 20mg/ml。
※ 用于细胞核染色过程时,Hoechst 33342的工作浓度是:0.5-10ug/ml。Hoechst 33342 荧光染料能少许进入细胞膜中,使喜宝妈们染上低蓝色,然而 凋亡细胞膜通透性增强,所以进入凋亡细胞的 Hoechst 33342 要比正常细胞的量大,凋亡细胞荧光强度要比正常细胞的高,除此之外,凋亡细胞的染色体DNA 结构发生改变后,使该染料可以更有效的与 DNA 进行结合,且凋亡细胞膜上的 p-糖蛋白泵功能受到损伤后不可以有效的将 Hoechst 33342 排出到细胞外,使之在细胞内积累增加,都会让凋亡细胞的蓝色荧光增强。然而 PI染料 是不能进入到细胞膜完整的正常细胞以及凋亡细胞中,所以活细胞对 PI染料拒染,但坏死细胞由于膜完整性在早期已经被破损,所以是可以被PI染料进行染色的。根据以上特性,用 Hoechst 33342 结合 PI染料对凋亡细胞进行双染色,就可以在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞以及坏死细胞进行区别来。
※ 在双变量流式细胞仪散点图上,这三群细胞分别表现为:正常细胞为低蓝色/低红色(Hoechst 33342+/PI+),凋亡细胞为高蓝色/低红色(Hoechst 33342++/PI+),坏死细胞为低蓝色/高红色(Hoechst 33342+/PI++)。
注意事项
1. 实验前需戴好防护眼镜,穿戴防护服和口罩,佩戴手套,避免与皮肤接触。
2. 实验过程中如遇到有毒或者刺激性物质及有害物质产生,必要时实验操作需要手套箱内完成以免对实验人员造成伤害。
3. 取样品的移液枪头需及时更换,必要时为避免交叉污染尽可能选择滤芯吸头。
4. 称量药品时选用称量纸,并无风处取药和称量以免扬撒,试剂的容器使用前务必确保干净,并消毒。
5. 取药品时尽量采用多个药勺分别使用,使用后清洗干净后,烘干消毒存放。
6. 实验后产生的废弃物需分类存储,并交于专业生物废气物处理公司处理,以免造成环境污染。
购买说明
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